Maladies bactériènnes
TP Bactériologie , Identification des bactéries Gram+ et Gram-
I- Coloration de Gram
La coloration de Gram ( mis au point par Christian Gram en 1884 ), permet de différencier les bactéries en fonction des propriétés de la paroi.
Technique :
1) Mordançage par le lugol
- recouvrir le frottis avec de Lugol.
- laisser agir une minute.
- eliminer l'excès de lugol et rincer la lame avec de l'eau distillèe.
2) Décoloration par l'alcool
- recouvrir le frottis d'alcool ou d'éthanol et laisser agir 10 s.
- rincer la lame, les deux côtés avec de l'eau distillée.
3) Recoloration par la fuchsine
- recouvrir le frottis avec une goutte de la fuchsine
- laisser agir 10s.
- rincer la lame , les deux côtés avec de l'eau distillée.
4) Séchage
- séchage à l'aide d'un papier absorbant.
5) Observation
- observation sous microscope optique GX100 à immersion avec une goutte d'huile .
6) Identification
- la taille , petite , moyenne et grande
- coloration , Gram+ violet , Gram- rose
- groupement , par 2, amas , chaînettes