Maladies bactériènnes

TP Bactériologie , Identification des bactéries Gram+ et Gram-

I- Coloration de Gram 

La coloration de Gram ( mis au point par Christian Gram en 1884 ), permet de différencier les bactéries en fonction des propriétés de la paroi. 


Technique : 

  1) Mordançage par le lugol 

         - recouvrir le frottis avec de Lugol. 

         - laisser agir une minute. 

        - eliminer l'excès de lugol et rincer la lame avec de l'eau distillèe. 

  2) Décoloration par l'alcool 

         -  recouvrir le frottis d'alcool ou d'éthanol et laisser agir 10 s.

         - rincer la lame, les deux côtés  avec de l'eau distillée.

 3) Recoloration par la fuchsine 

          - recouvrir le frottis avec une goutte de la fuchsine 

         -  laisser agir 10s.

         - rincer la lame , les deux côtés avec de l'eau distillée. 

 4) Séchage 

          - séchage à l'aide d'un papier absorbant. 

 5)  Observation 

         - observation sous microscope optique GX100 à immersion avec une goutte d'huile .

  6) Identification 

        - la taille , petite , moyenne et grande 

       - coloration , Gram+ violet , Gram- rose 

       - groupement , par 2, amas , chaînettes